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恒溫振蕩器如何應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

更新時(shí)間:2017-11-04      瀏覽次數(shù):3068

恒溫振蕩器如何應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 

    我們知道細(xì)胞培養(yǎng)不論在生物工程技術(shù)或是生物克隆技術(shù)中都是*的一個(gè)過(guò)程,那么我們?cè)谧黾?xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用到哪些器材或者媒介呢?所需器材和媒介一般分為:水、PBS、、胰蛋白酶溶液、恒溫振蕩器CO2培養(yǎng)箱,這幾類可以幫到我們的實(shí)驗(yàn)。

下面我們簡(jiǎn)單介紹下各種媒介的作用:

1、水:細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水。

2PBS :主要用于免疫組化染色時(shí)組織或細(xì)胞的漂洗。

3、胰蛋白酶溶液:胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力zui強(qiáng)。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過(guò)晚。

4、恒溫振蕩器的應(yīng)用:體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數(shù)情況下,恒溫振蕩器zui適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過(guò)±0.5℃,細(xì)胞在溫度升高2℃時(shí),持續(xù)數(shù)小時(shí)即不能耐受,40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的恒溫振蕩器,如具有較高控溫精度的恒溫振蕩器或恒溫培養(yǎng)箱。

5CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的*儀器,它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、CO2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。因?yàn)樯锂a(chǎn)品都是從細(xì)胞得來(lái),所以可以說(shuō)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中zui核心、zui基礎(chǔ)的技術(shù)。那么恒溫振蕩器的溫控精度在細(xì)胞培養(yǎng)中就顯的尤為重要。

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